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沃特世色谱柱在中药指纹图谱研究中的应用

放大字体  缩小字体 发布日期:2014-08-21
 指纹图谱作为中药复杂样品体系质量控制强有力的技术手段,能够较全面反映中药内在质量,已赢得国际上的广泛认可并得到迅速发展。2010版中国药典收载高效液相色谱特征图谱7项,指纹图谱13项,其中中成药6项,提取物14项,为中药产品质量的控制开辟了新途径,成为我国中药企业的一次重大突破。

1、复方丹参滴丸

【指纹图谱】色谱条件与系统适用性试验

用Waters® ACQUITY UPLC® HSS T3(柱长为100mm,内径为2.1mm,1.8μm)色谱柱;以含0.02%磷酸的80%乙腈溶液为流动相A,以0.02%磷酸溶液为流动相B,按中国药典<一部>第907页条件进行梯度洗脱;流速为每分钟0.4ml;检测波长为280nm;柱温为40℃。理论板数按丹参素峰计算应不低于8000。


2、三七三醇皂苷

【指纹图谱】

按中国药典<一部>第368页条件运行,共有5个色谱峰,其中2号峰为三七皂苷R1,3号峰为人参皂苷Rg1,4号峰为人参皂苷Re,作为参照峰。色谱柱: Waters SymmetryShield™ RP18, 5μm ,250×4.6mm。

3、生脉注射液、参附注射液

【指纹图谱】色谱条件与系统适用性试验
固定相采用Waters SymmetryShield RP18色谱柱(4.6mm×250mm;5.0μm);柱温30℃,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,梯度洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于1350000。测定法 分别精密吸取参照物溶液和本品各10μl,注入液相色谱仪,测定。在8~95分钟范围内,应呈现十七个与生脉注射液对照指纹图谱相对应的特征峰。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算,以特征峰计算相似度,本品指纹图谱与生脉注射液对照指纹图谱比较,相似度应不得低于0.80。另对供试品色谱图中所有峰面积值高于人参皂苷Rb1峰面积值的百分之五的色谱峰进行积分,非特征峰面积之和不得高于总峰面积的50%。(见国家药典委员会关于生脉注射液、参附注射液质量标准有关内容的公示)


中药指纹图谱研究的特点



适合中药指纹图谱研究的Waters色谱柱推荐

1)适合中药指纹图谱研究的色谱柱推荐之T3


XSelect™ HSS T3,采用三官能团键合,低配基密度(~1.6 μmol/m2)C18 烷基链键合和专利的封端技术,是沃特世公司最先进的键合和封端技术的有力体现。

• 在增强极性化合物保留能力的同时,维持了对中等和强疏水化合物的适度保留能力,又称“平衡柱”,能够对同时包含强极性和疏水性的复杂中药组分提供适中的保留。

• LC-MS兼容

• 耐受100%水相流动相

• 分离重现性好

对应的UPLC®色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3,典型应用如国家药典委员会公示的护肝胶囊、护肝颗粒含量测定,用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1×100mm,1.7μm)分析,要求理论板数按五味子乙素峰计算不低于150000。

2)适合中药指纹图谱研究的色谱柱推荐之Shield RP18


Shield RP18色谱柱基于沃特世专利的内嵌极性基团技术,能够“屏蔽”(shield,英文有“护罩” 、“ 屏蔽” 的含义)硅胶表面的残留硅醇基,使其不能与碱性较大的化合物发生拖尾作用。Waters Shield技术在硅胶颗粒和BEH颗粒上均高度成功, SymmetryShield RP18色谱柱在pH2-8范围内提供独特选择性,峰形与分离度都显著改善,并且完美兼容高水相条件;而BEH Shield RP18更将此诸多优势拓展到pH2-11的宽范围,为方法开发提供了极大灵活性。Shield RP18对含有生物碱、极性组分等中药体系都是良好的选择,更有相对应的ACQUITY UPLC色谱柱为获得超高分辨率和实现快速分离提供保障。

 
 
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